欢迎来到 阿仪网

免费注册

首页 | 产品 | 求购 | 资讯 | 专题 | 找厂商 | 打听 | 人才 | 品牌 | 资料 | 技术文献 | 展会 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促销 | 书籍 | 招标 | 优质仪器
广告

您的位置: 首页 >技术文献 >技术交流 >鱼高密度脂蛋白(HDL)ELISA测定试剂盒

鱼高密度脂蛋白(HDL)ELISA测定试剂盒

提供者:上海臻科生物科技k8凯发体育   发布时间:2019/10/17  阅读次数:50次   进入该公司展台

鱼高密度脂蛋白HDL)ELISA测定试剂盒 
 
 
 本试剂盒用于体外定量检测体液、腔液、组织匀浆及相关液体样本鱼高密度脂蛋白HDL)的含量。
有效期:6个月
 保存条件:2-8℃
 
 
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包鱼高密度脂蛋白HDL)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鱼高密度脂蛋白HDL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
 
样本处理及要求
1.  血清将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
 
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
 
试剂盒组成
 
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
8孔×12
8孔×6
标准品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
样本稀释液
6mL
3mL
检测抗体-HRP
10mL
5mL
20×洗涤缓冲液
25mL
15mL
按说明书进行稀释
底物A
6mL
3mL
底物B
6mL
3mL
终止液
6mL
3mL
封板膜
2张
2张
说明书
1份
1份
自封袋
1个
1个
1.  标准品浓度依次为:64、32、16、8、4、2 mg/dL
2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
 
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置
 
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
 
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.  样本孔待测样本50μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
实验结果计算
所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程将样品的OD值代入方程,计算出样品浓度
 
试剂盒性能
1.  检测范围2 mg/dL  64 mg/dL
2.  灵敏度:最低检测浓度小于0.1 mg/dL
3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 

关键词:鱼高密度脂蛋白(HDL)ELISA测定试剂盒  

上一篇:鱼黑色素(ML)ELISA试剂盒专业代测 下一篇:大鼠免疫球蛋白G2a(IgG2a)ELISA试剂盒优质厂家

优质商品

X射线荧光光谱仪
X射线荧光光谱仪
  • 超声波细胞粉碎机供应商
    超声波细胞粉碎机供应商
  • 电脑多元素联测分析仪
    电脑多元素联测分析仪
  • 松下(三洋) 高压灭菌器
    松下(三洋) 高压灭菌器
  • 蒸汽流量计 空气流量计
    蒸汽流量计 空气流量计
  • 全自动煤岩分析仪
    全自动煤岩分析仪
  • 固体静态负离子浓度测试仪
    固体静态负离子浓度测试仪
  • 工业冷水机
    工业冷水机
  • 氰化氢检测仪生产厂家
    氰化氢检测仪生产厂家
  • 有氧厌氧呼吸仪
    有氧厌氧呼吸仪
  • DN50-300大口径超声波热量表
    DN50-300大口径超声波热量表
  • 旗下频道

    色谱仪 光谱仪 反应釜 试验箱 试验机 搅拌器 培养箱 离心机 水分测定 气体检测 量热仪 石油仪器 纯水器 比表面仪 温度记录 流量计 万用表 显微镜 粒度仪 测厚仪 硬度计 酸度计 元素分析 生物试剂 电线电缆 天平衡器 传感器 食品检测 压力仪表 电化学 测厚仪 阀门仪表 电力仪表 干燥设备 药物检测