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    当前位置: 阿仪网 > 生物试剂 > 试剂盒 > 兔ELISA试剂盒 > 南京森贝伽生物科技k8凯发体育 > 产品展示 > ELISA试剂盒 > 兔ELISA试剂盒 > 兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒

    兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒

    价格:¥电议

    品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2019/6/21更新时间:2019/6/21

    产品摘要:南京森贝伽兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒全程免费技术指导,且我司还免费为您提供待测服务,产品操作简单易保存。

    产品完善度: 访问次数:202

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    参观次数:208335

    手机网站:http://wap.app17.com/c140931/

    公司网站:http://www.sbjbio.com

    详细内容

    兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa试剂盒基本信息:

    英文名称:Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit

    产品货号:SBJ-T0007

    产品规格:96(孔)/48(孔)

    所属品牌:森贝伽

    检测方法:酶免法/酶联免疫法(ELISA)

    产品用途:仅供科研使用

    保存条件:2-8℃

    有效期:六个月

    ELISA原理 

     

    兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒样本处理及要求:

    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

     

    兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒操作步骤:

    1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为30 IU/L,20 IU/L ,10 IU/L,5 IU/L,2.5 IU/L)。

    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 温育:操作同3。

    8. 洗涤:操作同5。

    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

     

    兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒检测过程中的常见问题还是很多的,下面所提到的是我司在检测过程中所遇到的一些ELISA产品会出现的问题及解决方法:

    出现问题

    问题的原因

    解决办法

    加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低

    未加入酶标记物

    请按照操作步骤进行

    试剂盒内容物未能充分回

    确定试剂盒内容物回温后再进行操作

    室温太低

    若室温太低(<19℃),适当延长温育时间

    未使用试剂盒的清洗液清洗

    请用试剂盒内所提供的清洗液清洗

    试剂盒已过有效期限

    请更换成仍在有效期限内的试剂盒

    标准曲线线性不佳,或是平行性不好

    温育位置避光不好或受到气流干扰

    请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)

    操作时间拖太久

    请在方法熟练后再进行操作

    微孔间相互污染

    加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染

    标准品或酶标记物所加入的量不一致

    请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性

    添加样品或试剂的操作方法不正确

    加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔

    洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)

    请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤

    吸光值均偏高(或线性不够陡)

    底物溶液受到污染

    若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用

    反应时间超过太久

    请控制反应时间

    酶标记物污染了盒内其它试剂

    使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

    阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值

    微孔中的试剂未能充分混合

    试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀

    洗板过程发生问题

    请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤

    添加样品或酶标记物的量不一致

    请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性

     

    公司长期生产经营各种ELISA试剂盒包括人、大小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、羊、鸡、鸭、猴、植物等ELISA试剂盒并提供免费代测服务。如有需要欢迎来电咨询。

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